生物層干涉術(shù)（Biolayer Interferometry, BLI）是一種非標記的、實時監(jiān)測的先進技術(shù)，主要用于生物分子間或是生物分子與小分子間相互作用分析。在蛋白與配體的相互作用檢測時，基于傳統(tǒng)細胞表達的蛋白樣品通常需要經(jīng)過復雜的細胞破碎、純化等前處理。然而在本案例中，通過無細胞表達技術(shù)獲得的重組蛋白，實現(xiàn)了上清液零處理直接BLI檢測！

1.高可溶表達：SDS-PAGE清晰顯示，3個蛋白在無細胞表達上清液中均呈現(xiàn)強目的條帶（圖1），傳統(tǒng)大腸桿菌系統(tǒng)中易形成的包涵體難題被破解！

2.低背景：蛋白3經(jīng)BLI（生物膜層干涉技術(shù)）檢測顯示：帶His標簽的目的蛋白與背景信號區(qū)分度高（圖3），表明表達產(chǎn)物背景干擾小，無需復雜純化即可直接用于下游結(jié)合實驗。

3.強親和活性：最令人振奮的是——蛋白2與其配體蛋白的BLI實時結(jié)合曲線顯示典型高效結(jié)合特征，表明該蛋白具有強親和活性！這種無細胞快速表達+BLI快速檢測親和活性的方案，將為藥物靶點蛋白篩選貢獻新速度。